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李斯特菌顯色培養(yǎng)基的應(yīng)用

更新時間:2018-10-11  |  點(diǎn)擊率:1394

李斯特菌屬( Listeria.spp) 經(jīng)常存在于各種動物和環(huán)境中,來源于土壤和水中的李斯特菌可能污染人類消費(fèi)品,特別是即食食品。與其他常見致病菌相比,單核細(xì)胞增生李斯特菌的感染率雖然較低,但致死率高達(dá) 20%~50%。因此,地從食品等樣品中分離和鑒別出單核細(xì)胞增生李斯特菌,對食品質(zhì)量控制和疾病預(yù)防治療有重要意義。

 

ISO、FDA 及我國衛(wèi)生部推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法和替代方法是用 PALCAM 和顯色培養(yǎng)基進(jìn)行檢測和分離。傳統(tǒng)的PALCAM 經(jīng)過長期的應(yīng)用驗(yàn)證,能有效地分離李斯特菌,但無法區(qū)分致病和非致病的李斯特菌,另外許多七葉苷陽性的菌也會產(chǎn)生一些假陽性及干擾。

 

近年來興起的李斯特菌顯色培養(yǎng)基,通常是采用屬特異性β-葡萄糖苷酶和磷脂酰肌醇或膽堿酶顯色技術(shù)。平板制備時對磷脂酰肌醇或膽堿配套試劑要求嚴(yán)格,溫度過高會產(chǎn)生絮狀物,難以觀察到菌落特征,溫度過低又易凝固而不能再次加熱溶解。

 

實(shí)驗(yàn)過程中顯色培養(yǎng)基的質(zhì)量,直接決定實(shí)驗(yàn)的成敗。推薦使用進(jìn)口產(chǎn)品,HiMedia公司(微生物培養(yǎng)基生產(chǎn)商)生產(chǎn)的顯色培養(yǎng)基,其他顯色培養(yǎng)基廠家比較,HiMedia顯色培養(yǎng)基在普通顯色培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上改良,形成自己*產(chǎn)品,顯色效果區(qū)分明顯,特異性較強(qiáng),產(chǎn)品種類更豐富。如對于李斯特菌的檢測,目前有5款產(chǎn)品可以選擇。

 

產(chǎn)品1:單增李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基(貨號:MV1540)

選擇鑒別性分離單核細(xì)胞增生李斯特氏菌。

它的特點(diǎn)是可區(qū)分單增李斯特氏菌與英諾克李斯特氏菌,但無法區(qū)分單增李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌。該培養(yǎng)基*符合我國食品安全檢測標(biāo)準(zhǔn)GB4789.30-2016,國標(biāo)優(yōu)選 ALOA法。

原理:依據(jù)李斯特菌*的β-葡糖苷酶及磷脂酰肌醇特異性磷脂酶C(PIPLC)活性。

 

 

產(chǎn)品2:HiCrome單增李斯特氏菌鑒別瓊脂基礎(chǔ)(貨號:M2009)

與貨號MV1540不同的是依據(jù)李斯特菌的β-半乳糖苷酶和磷脂酰膽堿特異性磷脂酶C(PCPLC活性)注:不是PIPLC

 

 

 

產(chǎn)品3:HiCrome單增李斯特氏菌快速鑒別瓊脂基礎(chǔ)(貨號:M1924)

該培養(yǎng)基適用于快速鑒定和鑒別單增李斯特菌,并與其他李斯特菌菌種區(qū)分。

原理:除了依據(jù) “β-葡糖苷酶”、和“PIPLC活性”外,增加了“鼠李糖發(fā)酵”的檢測,從而對綿羊李斯特菌(伊氏李斯特氏菌)、英諾克李斯特菌和單增李斯特氏菌三者能夠進(jìn)行區(qū)分。

 

產(chǎn)品4:單增李斯特氏菌驗(yàn)證瓊脂基礎(chǔ)(MV1552)

用于從臨床和食品樣本選擇性分離鑒別單核細(xì)胞增生李斯特菌。

原理:依據(jù)PIPLC活性和α-甲基-D-甘露糖苷的發(fā)酵。

它不是顯色培養(yǎng)基,但能區(qū)分單增李斯特氏菌、伊氏李斯特氏菌和英諾克李斯特氏菌。

 

 

產(chǎn)品5:HiCrome李斯特氏菌瓊脂基礎(chǔ)(M1417,M1417F)

從食品和臨床樣本中快速選擇、鑒別、鑒定李斯特菌。

M1417、M1417F均能鑒別出李斯特菌。此外,M1417還能鑒別是否發(fā)酵鼠李糖,M1417F能鑒別是否發(fā)酵木糖,因而能區(qū)分伊氏和單增。

 

 

 

 

實(shí)驗(yàn)過程中,可以根據(jù)具體的需求進(jìn)行選擇,HiMedia公司生產(chǎn)的顯色培養(yǎng)基與傳統(tǒng)培養(yǎng)基相比,克服了傳統(tǒng)培養(yǎng)基在各種細(xì)菌分離、鑒別、計(jì)數(shù)等操作過程中比較復(fù)雜(需要有經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員)、耗時較長、敏感性低和特異性差的缺點(diǎn)。

 

Himedia顯色培養(yǎng)基在檢測細(xì)菌時,通常培養(yǎng)24小時通過觀察菌落顏色即能用肉眼對細(xì)菌進(jìn)行定性或定量分析,既縮短了檢測時間,減少了生化鑒定的過程,極大提高工作效率。

 

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