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微生物法測定食品水溶性維生素及小分子

更新時間:2018-05-22  |  點擊率:1823

如題,采用微生物法測定有兩個前提條件。一是使用的菌株需要對待測維生素足夠敏感,并能快速生長,其生長繁殖速度與待測維生素濃度存在一定的對應關系;二是該維生素為水溶性。國家食品安全標準中提到多種維生素測定的方法為微生物法?,F(xiàn)總結如下:

 

1、葉酸,微生物法檢測,鼠李糖乳桿菌ATCC7469

2、維生素B12,嬰幼兒食品和乳品檢測,微生物法,萊士曼乳桿菌ATCC 7830

3、維生素B6,微生物法檢測,用卡爾斯伯酵母菌ATCC 9080

4、泛酸,嬰幼兒食品和乳品檢測,微生物法,植物乳桿菌ATCC 8014

5、煙酸,微生物法檢測,植物乳桿菌ATCC 8014

6、生物素,微生物法檢測,植物乳桿菌ATCC 8014

7、肌醇,微生物法檢測,葡萄汁酵母菌ATCC9080

 

維生素B2在原來的國家食品安全標準GB5009.85-2003中也推薦微生物法,但該標準2017年廢止,現(xiàn)標準不包含微生物法。

 

圖.HiMedia生產的維生素B12測定用培養(yǎng)基

 

水溶性維生素的提取方法包括用緩沖液或硫酸溶液進行水解、調節(jié)pH值沉淀蛋白或者使用合適的蛋白沉淀劑、用合適的酶進行酶解等。

 

對于煙酸,數(shù)據(jù)表明大多數(shù)食品用水直接提取即可,但是谷類必須用酸或堿才能提取*。

 

對于泛酸,由于它對酸、堿的不穩(wěn)定性,樣品提取都用水溶解,在中性條件下直接提取或高壓處理。有人發(fā)現(xiàn)用淀粉酶處理酵母和動物組織后,得到的泛酸含量會增加。

 

對于生物素,有研究表明3mol/LH2SO4水解處理時,植物組織中的生物素不穩(wěn)定,受到一定的破壞;而動物組織中結合態(tài)的生物素能更多地游離出來,所以推薦用1mol/L H2SO4于121℃水解植物性來源的樣品2h、3mol/L于H2SO4121℃水解動物性來源的樣品2h。

 

對于維生素B6,有人發(fā)現(xiàn)植物性樣品用0.022mol/L鹽酸水解5h能得到zui大值,而米糠需要用1mol/L的鹽酸才能水解充分。

 

對于葉酸的測定,研究表明,蛋白酶、淀粉酶和葉酸軛合酶聯(lián)合提取,能使12種食品的葉酸水平平均提高19%。但對于不同食品應區(qū)分對待。如它對谷類產品有效,但對蔬菜則不然。蛋白酶能使菠菜釋放的葉酸,而淀粉酶無效??傊?,適宜的前處理方法有助于獲得zui大檢出結果。

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